1. Travay prensip G418 tès depistaj 293T selil yo
G418 se yon antibyotik neomicin ki entèfere ak sentèz pwoteyin entraselilè, kidonk lakòz lanmò selil. Sepandan, selil ki gen jèn rezistans neomicin ka pwodwi pwoteyin rezistans pou reziste toksisite G418. Se poutèt sa, nan yon mwayen kilti ki gen G418, sèlman selil ki gen jèn rezistans neomicin ka siviv ak grandi.
2. Efè konsantrasyon G418 sou selil 293T
Efè konsantrasyon G418 sou selil 293T gen plizyè aspè, ki gen ladan kwasans selil, viabilite selil, mòfoloji selilè ak rezistans selil. Efè espesifik konsantrasyon G418 sou selil 293T yo sitou manifeste nan aspè sa yo:
1. Kwasans selil: Nan pi ba konsantrasyon G418 (tankou 0.25 mg/ml), selil 293T ka grandi nòmalman, dansite selil la piti piti ogmante, epi mòfoloji a rete bon. Avèk ogmantasyon konsantrasyon G418 (tankou 0.5 mg/ml), to kwasans selil la kòmanse ralanti epi dansite selil la ap ogmante tou dousman. Lè konsantrasyon G418 la rive nan 1 mg/ml, kèk selil kòmanse mouri ak dansite selil la diminye anpil. Kontinye ogmante konsantrasyon G418 la (tankou 2 mg/ml), lanmò selil la pi grav epi dansite selil la diminye. 2. Selil viabilite: Plis konsantrasyon G418 la pi wo, se pi ba viabilite selil la. Nan konsantrasyon ki ba nan G418 (tankou 0.25 mg/ml), viabilite selil la wo, mòfoloji selil la plen, ak tach la se inifòm. Kòm konsantrasyon nan G418 ogmante, viabilite selil piti piti diminye, mòfoloji selil la vin iregilye, ak tach se inegal. Nan gwo konsantrasyon G418 (tankou 2 mg/ml), viabilite selil yo ba, mòfoloji selil yo domaje anpil, ak tach se nòmal.
3. Mòfoloji selilè: Plis konsantrasyon G418 la pi wo, se plis mòfoloji selil la iregilye. Nan konsantrasyon ki ba nan G418, mòfoloji selil la gra, ki gen fòm file oswa plat. Kòm konsantrasyon nan G418 ogmante, mòfoloji selil la vin iregilye, volim selil la retresi, ak bor selil yo pa klè. Nan gwo konsantrasyon G418, mòfoloji selil la domaje anpil, kò selil la trè piti, ak bor selil yo kase.
4. Rezistans selilè: pi wo konsantrasyon nan G418, pi fò rezistans selil la. Nan konsantrasyon ki ba nan G418, selil yo pi sansib a G418 epi yo gen tandans lanmò selil. Kòm konsantrasyon nan G418 ogmante, selil yo piti piti devlope rezistans ak pousantaj siviv selil ogmante. Nan gwo konsantrasyon nan G418, rezistans selil yo rive nan pik li yo, ak selil yo kapab reziste toksisite nan konsantrasyon segondè nan G418.
Se poutèt sa, pou selil 293T, konsantrasyon tès depistaj G418 anjeneral ant 1-2 mg/ml. Konsantrasyon sa a ka ajiste selon kondisyon eksperimantal. Anjeneral pale, pi wo konsantrasyon tès depistaj la, pi bon efè tès depistaj la, men li pral lakòz tou sèten domaj nan selil yo. Se poutèt sa, lè w ap chwazi konsantrasyon tès depistaj la, li nesesè peze objektif eksperimantal la ak tolerans selilè. Nan operasyon aktyèl la, ou ka kòmanse ak yon konsantrasyon pi ba, tankou 0.5 mg/ml, obsève kwasans selil la, epi piti piti ogmante konsantrasyon an jiskaske ou jwenn yon konsantrasyon tès depistaj apwopriye.